杜氏盐藻叶绿体表达载体p64C-ANG-AAD的构建

潘卫东；张贵星；付庆；张娟；苏堤；薛乐勋

关键词：杜氏盐藻, 叶绿体, 表达载体, 人血管抑素

摘要：目的构建表达载体在杜氏盐藻叶绿体中表达重组人血管抑素(Angiostatin,ANG).方法利用基因工程技术将构建完整的人ANG基因插入到叶绿体启动子atpA5和终止子rbcL3′间,组成atpA-ANG-rbcL表达盒,将此表达盒与aadA表达盒串接后,插入含叶绿体同源片段的质粒载体p64上,构建成血管抑素盐藻叶绿体表达载体p64C-ANG-AAD.结果酶切鉴定结果表明,2.2kb的ANG表达盒和1.9kb的aadA表达盒已按照预期顺序插入到质粒p64C上叶绿体chlL基因间.结论叶绿体表达载体p64C-ANG-AAD可以应用于杜氏盐藻的叶绿体转化,表达重组人血管抑素.